½ð²©±¦ÍøÕ¾-è€ç”¨DTO-40工厂店,粗妥尔油(CTO)是硫酸ç›åˆ¶æ³•åˆ¶æµ†åŽ‚的副产å“。
“功能ç‰åŒç‰©â€è¿˜åŒ…å«æ ¹æ®æœ¬å‘明的多肽的“片段â€ï¼Œä¾‹å¦‚å•ä¸ªç»“构域或åºåˆ—基åºï¼Œæˆ–n末端和/或c末端截çŸçš„å½¢å¼ï¼Œå…¶å¯ä»¥æ˜¾ç¤ºæˆ–å¯ä»¥ä¸æ˜¾ç¤ºæœŸæœ›çš„生物å¦åŠŸèƒ½ã€‚ä¼˜é€‰åœ°ï¼Œè¿™æ ·çš„â€œç‰‡æ®µâ€è‡³å°‘定性地ä¿æŒæœŸæœ›çš„生物å¦åŠŸèƒ½ã€‚ä¸å…·æœ‰è‡³å°‘一个å¦å¤–的功能ä¸åŒçš„异æºåºåˆ—。这些异æºåºåˆ—çš„éžé™åˆ¶æ€§ä¾‹å是例如信å·è‚½ã€ç»„æ°¨é…¸é”šæˆ–é…¶ã€‚æ ¹æ®æœ¬å‘明还包括的“功能ç‰åŒç‰©â€æ˜¯ä¸Žå…·ä½“公开的多肽的åŒæºç‰©ã€‚2444-2448çš„ç®—æ³•è®¡ç®—ã€‚æ ¹æ®æœ¬å‘明的åŒæºå¤šè‚½çš„以百分比表示的åŒæºæ€§æˆ–åŒä¸€æ€§å°¤å…¶æ˜¯æŒ‡åŸºäºŽæœ¬æ–‡å…·ä½“æ述的氨基酸åºåˆ—之一的总长度,以氨基酸残基的百分比表示的åŒä¸€æ€§ã€‚或通过应用本文下é¢è¯¦è¿°çš„clustal设置æ¥ç¡®å®šã€‚
尾,其å‚与了mrnaå‘翻译ä½ç‚¹ä¾‹å¦‚细胞质的转è¿ã€‚术è¯â€œå¼•ç‰©â€æ˜¯æŒ‡çŸçš„åºåˆ—,其被æ‚交到模æ¿åºåˆ—并且被用于与该模æ¿äº’补的åºåˆ—çš„èšåˆã€‚
用于确定氨基酸或åºåˆ—åŒä¸€æ€§ç™¾åˆ†æ¯”的比对å¯ä»¥ä½¿ç”¨è®¡ç®—机程åºä»¥åŠä¾‹å¦‚在互è”网上å¯å…¬å¼€èŽ·å¾—的计算机程åºä»¥å¤šç§æ–¹å¼å®žçŽ°ã€‚æ¥èŽ·å¾—蛋白或åºåˆ—的佳比对并计算åºåˆ—åŒä¸€æ€§çš„百分比。å¯ä»¥ä»¥å·²çŸ¥æ–¹å¼é€šè¿‡åŒ–å¦åˆæˆä»Žæ ¸è‹·é…¸ç»“æž„å•å…ƒäº§ç”Ÿï¼Œä¾‹å¦‚通过åŒèžºæ—‹çš„å„个é‡å 的互补结构å•å…ƒçš„片段缩åˆæ¥å®žçŽ°ã€‚本å‘明进一æ¥æ¶‰åŠä¸Žå…·ä½“æè¿°çš„æ ¸è‹·é…¸åºåˆ—或其区段互补的分åã€‚æ ¹æ®æœ¬å‘æ˜Žçš„æ ¸è‹·é…¸åºåˆ—使得å¯ä»¥äº§ç”Ÿå¯ç”¨äºŽé‰´å®šå’Œ/或克隆其他细胞类型和生物体ä¸çš„åŒæºåºåˆ—çš„æŽ¢é’ˆå’Œå¼•ç‰©ã€‚ä¸Žæ ¹æ®æœ¬å‘明的åºåˆ—的有义链或相应的å义链的至少约12个,优选至少约25个,例如约50或75个连ç»æ ¸è‹·é…¸æ‚äº¤çš„æ ¸è‹·é…¸åºåˆ—区域。
å¦å¤–,包å«æ‰€å…¬å¼€çš„åºåˆ—之一或其片段的分åå¯ä»¥ä½¿ç”¨åŸºäºŽè¯¥åºåˆ—æž„å»ºçš„å¯¡æ ¸è‹·é…¸å¼•ç‰©ï¼Œé€šè¿‡èšåˆé…¶é“¾å应æ¥åˆ†ç¦»ã€‚以æ¤æ–¹å¼æ‰©å¢žçš„å¯ä»¥å…‹éš†åˆ°åˆé€‚的载体ä¸ï¼Œå¹¶å¯ä»¥é€šè¿‡dna测åºæ¥è¡¨å¾ã€‚æ ¹æ®æœ¬å‘æ˜Žçš„å¯¡æ ¸è‹·é…¸ä¹Ÿå¯ä»¥é€šè¿‡æ ‡å‡†çš„åˆæˆæ–¹æ³•ï¼Œä¾‹å¦‚使用自动dnaåˆæˆä»ªåˆ¶å¤‡ã€‚æ ¹æ®æœ¬å‘明的åºåˆ—或其è¡ç”Ÿç‰©ï¼Œè¿™äº›åºåˆ—çš„åŒæºç‰©æˆ–部分å¯ä»¥ä¾‹å¦‚通过常规的æ‚交技术或pcr技术从其他细èŒä¸ï¼Œä¾‹å¦‚通过组或cdna文库分离出æ¥ã€‚这些dnaåºåˆ—åœ¨æ ‡å‡†æ¡ä»¶ä¸‹ä¸Žæ ¹æ®æœ¬å‘明的åºåˆ—æ‚交。“æ‚交â€æ˜¯æŒ‡å¤šæ ¸è‹·é…¸æˆ–å¯¡æ ¸è‹·é…¸åœ¨æ ‡å‡†æ¡ä»¶ä¸‹ç»“åˆå‡ 乎互补的åºåˆ—的能力,而在这些æ¡ä»¶ä¸‹éžäº’è¡¥é…对者之间ä¸å‘生éžç‰¹å¼‚性结åˆã€‚
如本文所用,术è¯â€œæ‚交或在一定æ¡ä»¶ä¸‹æ‚交â€æ—¨åœ¨æè¿°æ‚交和洗涤的æ¡ä»¶ï¼Œåœ¨æ‰€è¿°æ¡ä»¶ä¸‹å½¼æ¤æ˜¾è‘—相åŒæˆ–åŒæºçš„æ ¸è‹·é…¸åºåˆ—ä¿æŒå½¼æ¤ç»“åˆã€‚本文æä¾›äº†ä½Žä¸¥æ ¼åº¦ã€ä¸ç‰å’Œé«˜ä¸¥æ ¼åº¦æ‚交æ¡ä»¶çš„定义。如本文所用,所é™å®šçš„ä½Žä¸¥æ ¼åº¦æ¡ä»¶å¦‚下。g/mlå˜æ€§é²‘鱼精ådna的溶液ä¸äºŽ40℃预处ç†6å°æ—¶ã€‚硫酸葡èšç³–,并使用5-20x106 32pæ ‡è®°çš„æŽ¢é’ˆã€‚å°†æ»¤è†œå¸å¹²å¹¶è¿›è¡Œæ”¾å°„自显影。如本文所用,所é™å®šçš„ä¸ç‰ä¸¥æ ¼åº¦æ¡ä»¶å¦‚下。g/mlå˜æ€§é²‘鱼精ådna的溶液ä¸äºŽ50℃预处ç†7å°æ—¶ã€‚如本文所用,所é™å®šçš„é«˜ä¸¥æ ¼åº¦æ¡ä»¶å¦‚下。g/mlå˜æ€§é²‘鱼精ådna组æˆçš„缓冲液ä¸äºŽ65℃下预æ‚交8å°æ—¶è‡³è¿‡å¤œã€‚g/mlå˜æ€§é²‘鱼精ådnaå’Œ5-20x106 cpm 32pæ ‡è®°æŽ¢é’ˆçš„é¢„æ‚交混åˆç‰©ä¸ï¼Œå°†æ»¤è†œåœ¨65℃下æ‚交48å°æ—¶ã€‚